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Muitos de vocês perguntaram sobre a vacina Covid-19 da Moderna e se ela usa células fetais abortadas ou não. Os links a seguir contêm todas as provas de que qualquer pessoa precisa para mostrar que a linha de células fetais abortadas HEK-293 foi de fato amplamente usada pela Moderna em várias patentes no design fundamental da tecnologia de mRNA, sua proteína Spike e na pesquisa, desenvolvimento, produção e testes.
Ao contrário das vacinas de cultura de células tradicionais, onde os vírus são cultivados em uma linha de células, as vacinas de mRNA não usam células para esse propósito e, portanto, não há células ou fragmentos de células nas vacinas. Alguns disseram que, como não há células fetais abortadas nas vacinas, elas são moralmente aceitáveis. Nada poderia estar mais longe da verdade, porque as células fetais abortadas eram certamente parte integrante da vacina da Moderna.
Agora, alguns argumentaram que algumas das patentes que citamos não são para a vacina real, no entanto, isso é totalmente irrelevante porque a tecnologia foi estabelecida usando células fetais abortadas. E não importa que as células não sejam usadas repetidamente de uma perspectiva moral. Isso também é verdadeiro para a proteína Spike produzida usando células HEK-293. Uma vez que a proteína é construída, as células não são usadas novamente. Mas a proteína é usada - e o mRNA é usado e ambos foram construídos com tecnologia que usava amplamente células fetais abortadas, tornando a vacina absolutamente imoral do início ao fim.
Então, vamos dar uma olhada nos fatos. A Moderna e o NIH trabalharam em conjunto na vacina Covid-19, conforme anunciado em várias publicações no início de 2020. Começando aqui…👇👇👇
Citando:
O Instituto Nacional de Alergia e Doenças Infecciosas fez parceria com a Moderna nesta vacina. Cientistas do NIAID fizeram a construção da vacina, ou protótipo, e a agência está realizando o teste de Fase 1.
E
Citando:
O NIAID está fazendo parceria com a Moderna em uma vacina de mRNA contra o nCoV 2019, disse Fauci. “Estamos pegando o gene para a proteína S de pico e inserindo-o em uma plataforma de mRNA para criar uma vacina.”
A proteína Spike fazia parte da joint venture NIAID. NIH fez a proteína Spike S -
Citando:
“MRNA-1273 é uma vacina de mRNA contra o novo coronavírus que codifica para uma forma estabilizada de pré-fusão da proteína Spike (S), que foi selecionada pela Moderna em colaboração com pesquisadores do NIAID Vaccine Research Center (VRC)”
Então, quando você olha para o trabalho do NIAID - esse artigo está aqui:
https://www.niaid.nih.gov/news-events/atomic-structure-novel-coronavirus-protein
Citando:
É importante ressaltar que os novos dados apóiam a abordagem do NIAID para uma vacina baseada em gene para COVID-19 e também serão úteis em outras abordagens de vacinas, incluindo vacinas baseadas em proteínas e outros ácidos nucleicos ou abordagens de entrega baseadas em vetores. Os cientistas do NIAID projetaram o antígeno de pico estabilizado com base no conhecimento anterior obtido do estudo de outras estruturas de pico de coronavírus. O NIAID e a empresa de biotecnologia Moderna, com sede em Cambridge, Massachusetts, estão desenvolvendo uma vacina de RNA mensageiro (mRNA), que direciona as células do corpo a expressar o pico em sua conformação de pré-fusão para provocar uma resposta imunológica.
E os Materiais e Métodos mostram as células 293.
https://science.sciencemag.org/content/sci/suppl/2020/02/18/science.abb2507.DC1/abb2507-Wrapp-SM.pdf
E se isso não bastasse, o uso de HEK pela Moderna não é novo ... patentes anteriores em 2015 mostram seu uso também. Use a função Localizar e digite HEK na pesquisa ... está listado 76 vezes.
Além disso - mais aqui mostrando como as células HEK-293 são usadas com a proteína Spike S:
https://www.sinobiological.com/research/virus/human-coronavirus-spike
Agora, se você ainda precisa se convencer de que a Moderna está usando células HEK-293, isso vem direto de seu próprio site:
https://www.modernatx.com/newsroom/publications
E na página de Publicações, consulte este link:
https://www.nature.com/articles/s41541-020-0163-z
Uma vez que lida com infecção pulmonar (causada por Covid-19), parece uma boa referência ao que eles estão fazendo. O uso de células 293 é citado em diversos locais inclusive nas informações complementares. Isso está ligado aqui:
O primeiro parágrafo mostra o uso de células 293 NA CONSTRUÇÃO. Os autores do estudo são Merck e Moderna.
E em julho de 2020: Uma vacina de mRNA contra SARS-CoV-2 - Relatório Preliminar
NOVA INGLATERRA JOURNAL OF MEDICINE
https://www.nejm.org/doi/full/10.1056/NEJMoa2022483
O que afirma claramente que eles estão usando a proteína Spike, que alguns tentaram negar.
Em Vaccine - Quoting:
A vacina candidata mRNA-1273, fabricada pela Moderna, codifica o antígeno S-2P, que consiste na glicoproteína SARS-CoV-2 com uma âncora transmembrana e um local de clivagem S1-S2 intacto. S-2P é estabilizado em sua conformação de pré-fusão por duas substituições consecutivas de prolina nas posições de aminoácidos 986 e 987, no topo da hélice central na subunidade S2.
E voila - Referência no. 8 na parte inferior da página não é outro senão:
Wrapp D, Wang N., Corbett KS, et al. Estrutura Cryo-EM do pico 2019-nCoV na conformação de pré-fusão. Science 2020; 367: 1260-1263.
Além disso, tanto o protocolo https://www.nejm.org/doi/suppl/10.1056/NEJMoa2022483/suppl_file/nejmoa2022483_protocol.pdf
e informações suplementares https://www.nejm.org/doi/suppl/10.1056/NEJMoa2022483/suppl_file/nejmoa2022483_apethoscope.pdf vinculado na parte inferior do artigo NEJM mostra o uso de HEK-293.
Também o artigo datado de agosto de 2020, mostra claramente o uso do HEK293 também para a vacina de mRNA-1273.
https://www.nature.com/articles/s41586-020-2622-0
Apenas uma amostra - página 9 do artigo da Nature:
Expressão e purificação da proteína MERS-CoV e SARS-CoV
Os vetores que codificam MERS-CoV S-2P1 e SARS-CoV S-2P23 foram gerados conforme descrito anteriormente com as seguintes pequenas alterações.
As proteínas foram expressas por transfecção de plasmídeos em células Expi293 usando reagente de transfecção Expifectamine (ThermoFisher) em suspensão a 37 ° C durante 4-5 dias. Os sobrenadantes da cultura de células transfectadas foram recolhidos, o tampão foi trocado por solução salina tamponada com fosfato (PBS) 1X e a proteína foi purificada utilizando resina Strep-Tactin (IBA). Para as proteínas usadas para inoculações em camundongos, os marcadores foram clivados com adição de protease HRV3C (ThermoFisher) (1% em peso / peso) durante a noite a 4 ° C. A cromatografia de exclusão de tamanho usando coluna Superose 6 Aument (GE Healthcare) produziu a proteína purificada final.
Projeto e produção de proteína Foldon de minifibritina recombinante
A construção foi expressa por transfecção transitória de células Expi293 (ThermoFisher) em suspensão a 37 ° C durante 5 dias. A proteína foi primeiro purificada com uma resina de ácido Ni2 + -nitrilotriacético (NTA) (GE Healthcare) usando um tampão de eluição que consiste em 50 mM de Tris-HCl, pH 7,5, 400 mM de NaCl e 300 mM de imidazol, pH 8,0, seguido de purificação com StrepTac
Linhas de celular
HEK293T / 17 (ATCC # CRL-11268), Vero E6 (ATCC), células Huh7.5 (fornecidas por Deborah R. Taylor, US Food and Drug Administration) e células 293T expressando ACE2 (fornecidas por Michael Farzan, Scripps
Expressão de mRNA in vitro
As células HEK293T foram transfectadas transitoriamente com mRNA que codifica a proteína SARS-CoV-2 WT S ou S-2P usando um kit de transfecção de mRNA TranIT (Mirus). Após 24 horas, as células foram colhidas e ressuspensas em tampão FACS (1X PBS, 3% FBS, 0,05% de azida de sódio). Para detectar a expressão da proteína de superfície, as células foram coradas com 10 µg / mL ACE2-FLAG (Sigma) ou 10 µg / mL CR302235 em tampão FACS por 30 min em gelo. Depois disso, as células foram lavadas duas vezes em tampão FACS e incubadas com FITC anti-FLAG (Sigma) ou IgG anti-humano de cabra Alexafluor 647 (Southern Biotech) em tampão FACS por 30 min em gelo. Coloração viva / morta fixável em água (Invitrogen) foi utilizada para avaliar a viabilidade. A aquisição de dados foi realizada em um instrumento BD LSRII Fortessa (BD Biosciences) e analisados pelo software FlowJo v10 (Tree Star, Inc.)
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